怎么使用荧光生物显微镜,并记录图像?-365bet线上开户
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怎么使用荧光生物显微镜,并记录图像?
点击次数:145 发布时间:2019-10-11
  荧光生物显微镜是由倒置显微镜和落射荧光显微镜组成,仪器配有长工作距离平场消色差物镜、大视野目镜。倒置观察时配置长工作距离平场相衬物镜和带相衬装置的特长工作距离聚光镜,荧光观察时可进行激发滤色片组切换。
 
  该仪器具有成像清晰,视场广阔,结构紧凑,造型美观,操作舒适等特点,主要适用于培养瓶或培养皿内活体细胞和组织、流质、沉淀物等显微观察,也可应用于未染色透明活体和荧光切片的荧光显微观察。是生物学、细胞学、肿瘤学、遗传学、免疫学等研究工作的理想仪器。可供科研院所、医疗、防疫和农牧等部门使用。
 
  配置特点:
 
  配置荧光装置,带有四组荧光滤光片组;
 
  配置相衬装置,包括特长工作距离相衬聚光镜;
 
  配置长工作距离平场消色差物镜,视场平坦而且清晰;
 
  两路光路输出,一路用于观察,一路用于连接摄像装置;
 
  采用带有刻度标尺的双层机械载物台,同轴纵横向调节手轮,操作更灵便;
 
  采用粗微动同轴调焦机构,粗动松紧可调,带锁紧和限位装置,载物台的移动机构可拆卸。
 
  使用方法与注意事项
 
  使用方法:
 
  (1)将物料板放在舞台上。
 
  (2)打开调节器荧光显微镜。然后按下启动一套UV灯不能接近15分钟内点燃,后收盘不能重新启动3分钟。
 
  (3)将激励滤波器转换为V,将分色器调整为V,选择495或475nm阻塞滤波器。
 
  (4)使用uvfl40、uvfl100萤光镜检查。
 
  (5)将非荧光油加入到载玻片上,首先使用40X,然后用100X聚焦检测荧光。
 
  (7)由于在由随时间推移的UV荧光增加照射荧光物质逐渐减弱,因此应不断变化的视野检查。
 
  (8)紫外FL10或紫外FL20也可用作低倍材料(使用低倍显微镜时不加荧光油)。
 
  荧光图像的记录方法:
 
  观察到的荧光图像具有形态特征,具有荧光颜色和亮度。在判断结果时,必须结合起来作出的判断。结果是根据主观指标,即工人的眼睛来记录的。作为一般的定性观测,它基本上是的。随着科技的发展,客观指标被用来记录判断结果,如使用细胞分光光度计、图像分析仪等仪器。但是,这些文书所记录的结果也必须与主观判断相结合。
 
  荧光生物显微镜摄影对于记录荧光图像是非常必要的。由于荧光容易褪色和减弱,因此有必要对实时照相的结果进行记录。该方法与普通显微摄影方法基本相同。只需使用高速光敏膜,如ASA 200或以上或24。上面。由于紫外光对荧光的猝灭效应很大,如荧光标记物FITC等,在紫外光照射30s时,荧光亮度下降了50%,因此曝光速度太慢,无法捕捉到荧光图像。一般研究型产品有半自动或全自动显微摄影系统.
 
  注意事项:
 
  (1)严格按照操作说明书的要求制造的荧光显微镜,不改变该程序。
 
  (2)检查应在暗室进行。进入暗室后,接通电源,点燃超高压汞灯5-15分钟。当光源发出强光并稳定下来时,眼睛有效适应暗室,然后开始观察标本。
 
  (3)为防止紫外线对眼睛造成损害,调节光源时戴防护眼镜。
 
  (4)每次检查时间为1~2h,超过90min,超高压汞灯的发光强度逐渐降低,荧光降低;紫外线照射3~5分钟后荧光降低。因此,不超过2~3h。
 
  (5)检查应聚焦在试样上,为了节省时间,保护光源。天热时,冷却风扇应添加,更换灯泡应该开始新的记录时间。后灯可以点亮,然后熄灭是,受灯充分冷却。每日数次,以避免火源。
 
  (6)染色后,荧光会随着时间逐渐减弱。当试样在4℃下存放在聚乙烯塑料袋中时,可延迟荧光衰减时间,防止密封剂蒸发。
 
  (7)荧光亮度的确定标准:一般分为四个级别,即"1"-NO或可见弱荧光。"++"-只能看到明显可见的荧光。"(+)+"-可见且明亮。